Описание
Цитологические исследования
Стандартное морфологическое исследование эндометрия включает в себя определение клеточного состава, соотношения клеток, фазы менструального цикла, патологических изменений – признаков атипии, инфильтрации воспалительными клетками при световой микроскопии. Материалом для исследования является эндометрий, полученный методом аспирационной биопсии эндометрия или при гистероскопии с биопсией эндометрия, после выскабливания (кюретаж полости матки).
Иммуноцитотохимия – это метод исследования клеток, основанный на обнаружении специфических антигенов с помощью присоединения к ним антител, меченных флюорохромом или ферментом. Антигены – молекулы белков или углеводов, имеющие уникальную трёхмерную структуру, способные индуцировать образование антител. Антитела – иммуноглобулины, распознающие антигены и присоединяющиеся к ним во время реакции “антиген-антитело”. Антигены и антитела – это молекулы, неразличимые при исследовании методом световой и электронной микроскопии. Для обнаружения специфических антигенов к образцу клеток добавляют реагент, содержащий меченные флюорохромом или ферментом антитела, в результате чего образуется иммунный комплекс “антиген-антитело”. Комплексы формируют специфическое окрашивание клеток и их внутренних структур, обеспечивая детекцию патологических изменений на молекулярном уровне. Иммуноцитохимическое исследование позволяет верифицировать онкологические заболевания, метастатические поражения, определить их гистологическую принадлежность, оценить экспрессию маркеров, влияющих на прогноз заболевания и подбор схемы эффективной химиотерапии.
Эндометрий – слизистая оболочка, выстилающая полость матки изнутри, необходимая для имплантации оплодотворенной яйцеклетки и развития плаценты во время беременности. Он подвергается динамическим структурным и функциональным изменениям во время менструального цикла под действием женских половых гормонов. Ряд патологических состояний нарушает нормальное циклическое функционирование эндометрия у женщин репродуктивного возраста. Наиболее распространенными причинами считаются хронический эндометрит, полипы эндометрия, ановуляция и миома матки.
Хронический эндометрит – это воспалительное заболевание эндометрия, чаще поражающее женщин репродуктивного возраста, но встречающееся и в постменопаузе. Наиболее распространенный симптом – маточные кровотечения, не связанные с менструацией. Кроме того, хронический эндометрит может быть причиной бесплодия и самопроизвольного прерывания беременности. Факторами риска являются воспалительные заболевания органов малого таза, внутриматочные контрацептивы (спирали), хирургические манипуляции в полости матки (выскабливание), недавняя беременность, инфекционно-воспалительные осложнения послеродового периода, попытки экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов. Возбудителями заболевания чаще всего являются Escherichia coli, Enterococcus faecalis, различные виды стрептококков, Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum и вирусы (ВПЧ, вирусы герпеса, энтеровирус).
Инфекционные агенты запускают защитную воспалительную реакцию, происходит инфильтрация эндометрия макрофагами, лимфоцитами, плазматическими клетками, пролиферация фибробластов. Активированные макрофаги выделяют медиаторные цитокины, вызывающие активацию T- и B-лимфоцитов. Даже после полной элиминации инфекционного возбудителя воспаление может поддерживаться за счет аутоиммунных процессов – за счет первоначальной поликлональной активации лимфоцитов с последующей выработкой аутоиммунных антител. Воспаление вызывает изменения нормальной циклической дифференцировки и функционирования эндометрия, приводящие к нарушениям менструального цикла или снижению способности к имплантации оплодотворенной яйцеклетки.
Золотым стандартом диагностики хронического эндометрита считется гистологическое или цитологическое исследование биоптата эндометрия. Главным маркером является инфильтрация стромы эндометрия плазматическими клетками. Также часто обнаруживаются и другие воспалительные элементы: нейтрофилы (обычно в поверхностном эпителии и железах), субэпителиальные лимфоцитарные инфильтраты, гистиоциты с гемосидерином и редкие эозинофилы.
Поскольку эпизодические плазматические клетки обнаруживаются и в поздней секреторной фазе, и в строме полипов эндометрия, их присутствие не всегда означает инфекционную этиологию. В очень редких случаях обнаружение плазматических клеток в биоптате эндометрия может свидетельствовать о лимфопролиферативном заболевании.
Для дифференциальной диагностики используется метод иммуноцитохимии, позволяющий определить маркеры хронического эндометрита на молекулярном уровне и идентифицировать воспалительные клетки: плазматические клетки CD138, натуральные киллеры CD56 и CD16, B-клетки CD20 и активированные лимфоциты HLA-DR.
Увеличение количества натуральных киллеров CD56 и В-лимфоцитов (CD20) подтверждает активный хронический эндометрит. При активации аутоиммунного процесса при хроническом эндометрите определяется инфильтрация активированными лимфоцитами (HLA-DR).
При верификации диагноза назначается специфическая антибактериальная терапия. По результатам исследования можно оценить эффективность проводимой терапии, определить показания к ее коррекции.
Для чего используется исследование?
- Для определения характера иммунологических нарушений, выявления пациентов с аутоиммунным воспалением и аутоиммунным ответом в эндометрии, что определяет тактику их ведения.
Когда назначается исследование?
- При необходимости подтверждения или исключения хронического эндометрита;
- при утолщении эндометрия по результатам УЗИ;
- при нарушении репродуктивной функции (бесплодие, привычное невынашивание беременности, преждевременные роды);
- при нарушении менструального цикла (перименструальные кровянистые выделения, обильные менструации, ациклические маточные кровотечения); дисфункции яичников;
- при верификации диагноза при гиперплазии эндометрия, миоме матки, эндометриозе, хронических воспалительных заболеваниях;
- в качестве дополнительного исследования при оценке потенциальной эффективности гормональной терапии.
Что означают результаты?
Заключение выдается в виде описательного ответа с подсчетом количества клеток, экспрессирующих маркеры CD20+, CD56+, CD138+ и HLA-DR.
У женщин с хроническим активным эндометритом значительно повышено количество субпопуляции NK-клеток (CD56+) и субпопуляции В-лимфоцитов (CD20+), инфильтрирующих эндометрий, по сравнению пациентками контрольной группы.
Для аутоиммунного эндометрита характерна инфильтрация эндометрия цитотоксическими B-лимфоцитами (CD20+), плазматическими клетками (CD138+) и активированными лимфоцитами (HLA-DR) с последующим формированием аутоатител.
CD138+ клетки (синдекан 1) – протеогликаны, входящие в состав клеточных мембран плазматических клеток, в принципе, нехарактерны для здорового эпителия эндометрия. Интенсивность проявления клинических симптомов заболевания связана с повышенной концентрацией плазматических клеток (CD138+ ) в эндометрии.