Описание
Иммуногистохимические иследования
В процессе роста опухолей их клетки продуцируют и накапливают внутри себя или на своей поверхности различные молекулы. Некоторые из них являются специфичными для определенного типа тканей и по ним можно верифицировать гистологическую принадлежность новообразования. Другие маркеры являются мишенями для действия так называемых таргетных препаратов, соответственно, их наличие в опухолевых клетках позволяет оценить чувствительность опухоли к такой терапии. И наоборот, существуют маркеры, которые заведомо определяют резистентность опухолевых клеток к некоторым химиопрепаратам. Ещё одна группа маркеров характеризует интенсивность процессов деления в опухолевых клетках, активность процессов программируемой клеточной гибели, уровень белков, подавляющих опухолевый рост, а также метастатическую активность. Эти маркеры являются молекулярно-биологическими факторами прогноза и имеют большое значение в выборе тактики лечения злокачественных опухолей. Например, биологическую агрессивность опухоли можно определить по уровню пролиферативной активности (антитела к Ki67 и циклинам) и выраженности процессов программируемой клеточной гибели – апоптоза (антитела к bcl2, bclx, bax, bak), уровню белков, подавляющих опухолевый рост (антитела к р53, р16, Rb), состоянию маркеров инвазивной и метастатической активности клетки (антитела к Е-кадгерину, бета-катенину, металлопротеиназам).
Молекулярно-биологические маркеры в клетках опухоли могут быть выявлены при иммуногистохимическом исследовании биоптата или операционного материала опухоли. Для анализа из готового парафинового блока с помощью специального микроножа нарезают тончайшие срезы, которые затем прикрепляют к предметным стеклам и красят рутинными красителями, чтобы было возможно отличить клетки друг от друга и от межклеточного вещества. Затем срезы инкубируют с растворами антител, специфичных к определенному маркеру. Если он присутствует в опухолевой клетке, то антитела связываются с ним и остаются на срезе после смывания раствора. Чтобы выявить связавшиеся с маркерами антитела, добавляется раствор с еще одними антителами, на этот раз они связываются с первичными антителами, которые для них являются антигенами. Вторичные антитела имеют ферментную или флюоресцентную метку, благодаря которой их можно увидеть в микроскоп. Таким образом, иммуногистохимическое исследование дает возможность выявить наличие в клетках опухолей различных молекулярно-биологических маркеров.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики злокачественных новообразований, определения возможностей противоопухолевой терапии.
Когда назначается исследование?
- При первичной диагностике злокачественных новообразований, а также в клинических ситуациях, когда от наличия того или иного молекулярно-биологического маркера зависит тактика противоопухолевой терапии.
Что означают результаты?
Результат иммуногистохимического анализа представляет собой информацию о наличии или отсутствии в биоптате исследуемого молекулярно-биологического маркера, а при его наличии – степень выраженности ферментативного окрашивания или флюоресценции и процент опухолевых клеток, в которых эти явления наблюдаются.
Что может влиять на результат?
Качество предоставленных парафиновых блоков, опыт и квалификация врача-патоморфолога, так как иммуногистохимический метод не в полной мере стандартизирован и оценка его результатов в некоторой степени субъективна.
Важные замечания
Данный лабораторный тест предполагает исследование в предоставленном биоптате одного молекулярно биологического маркера. Существует большое количество прогностических маркеров, часть из них универсальны для многих злокачественных опухолей, другие же, наоборот, специфичны для определенного гистологического типа опухолевых клеток. Необходимый спектр маркеров для исследования определяется лечащим доктором или врачом патоморфологической диагностики, исходя из гистологического типа опухоли. Поэтому вместе с гистологическим материалом для исследования желательно предоставлять заключения уже проведенных гистологических и иммуногистохимических исследований, если таковые имеются.