Описание
Генетические исследования
Онкогенетика
Данное молекулярно-генетическое исследование направлено на выявление точечных мутаций в особых участках — экзонах — генов BRAF, NRAS и c-KIT. Эти генетические аномалии чаще всего связаны с развитием меланомы — злокачественного новообразования пигментных клеток (меланоцитов) кожи, для которого характерна высокая склонность к метастазированию. Помимо этого, меланома может развиваться в слизистых оболочках внутренних органов. Определение этих мутаций необходимо для последующего назначения пациентам с меланомой таргетной —прицельной — терапии.
Все три гена BRAF, NRAS и c-KIT являются представителями протоонкогенов, которые при развитии генетической аномалии формируются в онкогены — гены, усиливающие рост образовавшейся в результате мутации опухоли. Вышеуказанные гены кодируют, то есть образуют, одноименные белки BRAF, NRAS и c-KIT, относящиеся к группе белков системы сигнальных путей. Ключевая функция этой системы заключается в передаче сигнала — роста — от рецепторов на поверхности мембраны клетки к её ядру.
В физиологических условиях система сигнальных путей через биохимический каскад реакций контролирует клеточную жизнедеятельность: рост, развитие, выживание и размножение клеток. Белки BRAF, NRAS и c-KIT участвуют в передаче клеточных сигналов на разных уровнях и локализациях. При возникновении генетической аномалии в структуре этих генов функция клетки, в которой она произошла, изменяется: мутировавшая клетка перестает зависеть от сигналов роста и начинает бесконтрольно размножаться, впоследствии превращаясь в опухоль.
Для меланомы характерны следующие генетические аномалии:
- Ген BRAF — экзон 15 (наиболее частая мутация);
- Ген с-KIT — экзоны 11, 13 и 17;
- Ген NRAS — экзон 2 (12 и 13 кодоны) и экзон 3 (61 кодон).
Мутации гена BRAF в 15 экзоне являются наиболее частыми (>60%) при меланоме, а также крайне распространены у пациентов с доброкачественными невусами или родинками (> 80%). При этом самостоятельная аномалия в BRAF не приводит к малигнизации — озлокачествлению — меланоцитов, изолированно она способствует только преждевременному старению пигментных клеток. Установлено, что для развития злокачественного процесса, помимо мутации в этом гене, необходима дополнительная аномалия в гене P16/INK4a. Наиболее распространенным подвидом мутации BRAF является замена аминокислоты валин (V) на глутаминовую кислоту (E) в кодоне 600.
В случае гена NRAS также установлены наиболее частые мутагенные точки внутри экзонов — это 12, 13 и 61 кодоны. В этих участках гена происходит точечная мутация с заменой одной аминокислоты в кодоне на другую (аланин, аргинин, валин и др.).
Мутации в гене с-KIT зачастую используют в качестве дополнительной диагностики после выявления мутаций BRAF при подозрении или обнаружении метастазов меланомы.
Для молекулярного исследования вышеуказанных мутаций используют фрагмент биопсийного или гистологического материала.
Когда нужно сдавать анализ Определение мутаций 15 экзона BRAF, 2-3 экзонов NRAS и 11,13,17 экзонах с-KIT при меланоме?
Комплексная диагностика меланомы и отбор пациентов для последующего назначения таргетного лечения.